Univerzita P. J. Šafárika v Košiciach >> Prírodovedecká fakulta >> Ústav chemických vied

Katedra biochémie

 Pracovisko biochémie a štruktúrnej analýzy biomakromolekúl

Praktikum z biochémie

Odbor: CH Ročník: druhý Semester: letný Rozsah: 0/6

Obal

Predslov

Obsah

  1. Pracovný poriadok a zásady bezpečnosti práce v biochemickom laboratóriu.

Bielkoviny

  1. Reakcie na dôkaz aminokyselín a bielkovín.
    Izolácia kazeínu z mlieka. Stanovenie koncentrácie bielkoviny Lowryho metódou
  2. Stanovenie izoelektrického bodu ľudského albumínu.
    Frakcionácia bielkovín vaječného bielka. Dialýza bielkovín. Stanovenie koncentrácie bielkoviny biuretovou metódou.

Lipidy

  1. Stanovenie jódového čísla tukov Yasudovou metódou.
    Stanovenie čísla zmydelnenia tukov.
    Dôkaz cholesterolu: Salkowského reakcia.
    Výroba mydla. Reakcie s mydlom.

Sacharidy

  1. Reakcie na dôkaz sacharidov.
    Stanovenie redukujúcich sacharidov Schoorlovou metódou.
  2. Stanovenie redukujúcich a neredukujúcich cukrov v klíčiacich rastlinách.
  3. Izolácia kvasinkovej sacharázy. Stanovenie koncentrácie sacharázy Lowryho metódou. Stanovenie aktivity sacharázy na základe redukujúcich sacharidov.

Enzýmy

  1. Časový priebeh enzýmovo katalyzovanej reakcie: štiepenie želatíny trypsínom.
    Stanovenie aktivity katalázy.
  2. Rozklad bielkovín pepsínom.
    Vplyv pH na aktivitu a-amylázy. Substrátová špecificita glykozidáz: sacharázy a a-amylázy.
  3. Vplyv koncentrácie substrátu na počiatočnú rýchlosť reakcie: určenie Km a Vmax pre štiepenie močoviny ureázou.

Nukleové kyseliny

  1. Izolácia DNA zo sleziny. Izolácia RNA z droždia. Dôkaz zložiek DNA a RNA.
    Mikropreparatívna izolácia plazmidovej DNA.
  2. Elektroforéza nukleových kyselín. Spektrofotometrické stanovenie koncentrácie a čistoty nukleových kyselín.

Vitamíny

  1. Stanovenie koncentrácie vitamínu C 2,4-dinitrofenylhydrazínom. Dôkaz vitamínov A, B1, a C.
  2. Zápočtové cvičenie