Praktikum z biochémie

Odbor: EnCH Ročník: tretí Semester: zimný Rozsah: 0/6

Obal

Predslov

Obsah

1. Pracovný poriadok a zásady bezpečnosti práce v biochemickom laboratóriu.

Bielkoviny

2. Reakcie na identifikáciu aminokyselín a bielkovín.
   Izolácia kazeínu z mlieka. Stanovenie koncentrácie bielkoviny Lowryho metódou
3. Stanovenie izoelektrického bodu ľudského albumínu.
   Frakcionácia bielkovín vaječného bielka. Dialýza bielkovín. Stanovenie koncentrácie bielkoviny biuretovou metódou. Izolácia fosfatidylcholínu a fosfatidyletanolamínu zo žĺtka.

Sacharidy

4. Reakcie na identifikáciu sacharidov.
   Stanovenie redukujúcich sacharidov Schoorlovou metódou.
   Kvalitatívna analýza sacharidov tenkovrstvovou chromatografiou
5. Stanovenie redukujúcich a neredukujúcich cukrov v klíčiacich rastlinách.
6. Izolácia kvasinkovej sacharázy. Stanovenie koncentrácie sacharázy Lowryho metódou. Stanovenie aktivity sacharázy na základe redukujúcich sacharidov. Vplyv pH na aktivitu sacharázy.

Lipidy

7. Stanovenie jódového čísla tukov Yasudovou metódou.
   Stanovenie čísla zmydelnenia tukov.
   Stanovenie koncentrácie cholesterolu. Dôkaz cholesterolu: Salkowského reakcia.
   Výroba mydla. Reakcie s mydlom. Oxidácia nenasýtených mastných kyselín.

Enzýmy

8. Časový priebeh enzýmovo katalyzovanej reakcie: štiepenie želatíny trypsínom.
   Rozklad bielkovín pepsínom.
9. Stanovenie aktivity katalázy. Určenie rýchlostnej konštanty prvého poriadku. Vplyv pH na aktivitu a-amylázy. Substrátová špecificita glykozidáz: sacharázy a a-amylázy.
10. Vplyv koncentrácie substrátu na počiatočnú rýchlosť reakcie: určenie Km a Vmax pre štiepenie močoviny ureázou.

Nukleové kyseliny

11. Izolácia DNA zo sleziny. Izolácia RNA z droždia. Dôkaz zložiek DNA a RNA.
    Mikropreparatívna izolácia plazmidovej DNA.
12. Elektroforéza nukleových kyselín. Spektrofotometrické stanovenie koncentrácie a čistoty nukleových kyselín. Teplotná stabilita nukleových kyselín.

Vitamíny

13. Stanovenie koncentrácie vitamínu C 2,4-dinitrofenylhydrazínom. Dôkaz vitamínov A, B1, a C.
14. Zápočtové cvičenie